L'ingresso dalla Passeggiata del Gianicolo è possibile solo ai visitatori muniti di biglietto acquistato online. La biglietteria è situata all'ingresso principale

Abbonati: l'accesso per i possessori di abbonamento in corso di validità è garantito durante il normale orario di apertura, anche in concomitanza con eventi diurni. Sono rigorosamente esclusi dall'abbonamento gli eventi serali organizzati da soggetti esterni.
Dipendenti e Studenti Sapienza (Eventi diurni): in occasione di eventi che si svolgono durante il normale orario di apertura, il personale e gli studenti dell'Università Sapienza sono esentati dalla quota di ingresso di competenza dell'Orto Botanico. Sarà pertanto dovuto esclusivamente il pagamento della quota di partecipazione richiesta dall'organizzatore esterno.
Dipendenti e Studenti Sapienza (Eventi serali): per gli eventi serali organizzati da soggetti terzi, il personale e gli studenti Sapienza sono tenuti al pagamento della tariffa piena stabilita dagli organizzatori esterni, senza agevolazioni